胶原蛋白的测定方法和原理 或者说下下面这个实验叫什么方法 和它的原理 5.1 药品配制5.1.1 硫酸溶液[c(H2SO4)≈3 mol/L]\x05量取750 mL水于2 L的容量瓶中,在搅拌下缓慢加入320 mL浓硫酸().冷却至
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/06/24 16:55:54
![胶原蛋白的测定方法和原理 或者说下下面这个实验叫什么方法 和它的原理 5.1 药品配制5.1.1 硫酸溶液[c(H2SO4)≈3 mol/L]\x05量取750 mL水于2 L的容量瓶中,在搅拌下缓慢加入320 mL浓硫酸().冷却至](/uploads/image/z/6304418-26-8.jpg?t=%E8%83%B6%E5%8E%9F%E8%9B%8B%E7%99%BD%E7%9A%84%E6%B5%8B%E5%AE%9A%E6%96%B9%E6%B3%95%E5%92%8C%E5%8E%9F%E7%90%86+%E6%88%96%E8%80%85%E8%AF%B4%E4%B8%8B%E4%B8%8B%E9%9D%A2%E8%BF%99%E4%B8%AA%E5%AE%9E%E9%AA%8C%E5%8F%AB%E4%BB%80%E4%B9%88%E6%96%B9%E6%B3%95+%E5%92%8C%E5%AE%83%E7%9A%84%E5%8E%9F%E7%90%86+5.1+%E8%8D%AF%E5%93%81%E9%85%8D%E5%88%B65.1.1+%E7%A1%AB%E9%85%B8%E6%BA%B6%E6%B6%B2%5Bc%28H2SO4%29%E2%89%883+mol%2FL%5D%5Cx05%E9%87%8F%E5%8F%96750+mL%E6%B0%B4%E4%BA%8E2+L%E7%9A%84%E5%AE%B9%E9%87%8F%E7%93%B6%E4%B8%AD%2C%E5%9C%A8%E6%90%85%E6%8B%8C%E4%B8%8B%E7%BC%93%E6%85%A2%E5%8A%A0%E5%85%A5320+mL%E6%B5%93%E7%A1%AB%E9%85%B8%EF%BC%88%EF%BC%89.%E5%86%B7%E5%8D%B4%E8%87%B3)
胶原蛋白的测定方法和原理 或者说下下面这个实验叫什么方法 和它的原理 5.1 药品配制5.1.1 硫酸溶液[c(H2SO4)≈3 mol/L]\x05量取750 mL水于2 L的容量瓶中,在搅拌下缓慢加入320 mL浓硫酸().冷却至
胶原蛋白的测定方法和原理 或者说下下面这个实验叫什么方法 和它的原理
5.1 药品配制
5.1.1 硫酸溶液[c(H2SO4)≈3 mol/L]
\x05量取750 mL水于2 L的容量瓶中,在搅拌下缓慢加入320 mL浓硫酸().冷却至室温后用水定容.
5.1.2 缓冲溶液(pH=6.8)
将26.0 g一水柠檬酸、14.0 g氢氧化钠和78.0 g无水乙酸钠用500 mL水溶解,转入1 L容量瓶,加入250 mL正丙醇,用水定容.该溶液于4 ℃暗处可稳定保存几周.
5.1.3 氯胺T溶液
称取1.41 g三水N-氯-对甲苯磺酰胺钠盐(氯胺T),用100 mL缓冲溶液溶解,临用前配制.
5.1.4 显色剂
称取10.0 g对二甲氨基苯甲醛,用35 mL高氯酸溶液(质量分数60%)溶解,缓慢加入65 mL异丙醇.临用前配制.
5.1.5 羟脯氨酸标准溶液
\x05标准储备液:称取50 mg 4-羟基-α-吡咯甲酸(羟脯氨酸)于100 mL 容量瓶中,用水溶解,加一滴硫酸溶液,用水定容.该溶液4 ℃下可稳定存放1个月.
\x05标准工作液:移取5.00 mL上述标准储备液至500 mL容量瓶中,用水定容.分别吸取该溶液10、20、30和40 mL于100 mL容量瓶中,用水定容,所得标准工作液浓度依次为0.5、1.0、1.5和2.0 .临用前配制.
5.2
5.2.1 样品前处理
\x05将鱼皮流水解冻,去除多余碎肉及脂肪,清洗干净,吸油纸吸去表面水分,剪碎.
5.2.2 样品水解
\x05精确称取4 g鱼皮放入烧瓶中,避免粘在烧瓶壁上,加入30 mL硫酸溶液,用表面皿盖住,在105 ℃干燥箱内恒温16 h.
\x05用圆形滤纸趁热将水解产物过滤至250 mL容量瓶中,用10 mL硫酸溶液分三次洗涤烧瓶和滤纸,合并至上述容量瓶,用水定容,摇匀.用移液管移取10 mL该水解液至250 mL容量瓶中,定容摇匀.
5.2.3 测定
\x05移取4.00 mL上述溶液于比色管中,加入2.00 mL氯胺T试剂,混合后于室温下放置20 min.
\x05加入2.00 mL显色剂于比色管中,充分混合,用塑料薄膜将比色管封口,迅速放入60 ℃水浴中加热20 min.
\x05取出比色管,流水冷却比色管至少3 min,室温下放置30 min.
\x05用水做参比,于558 nm处测吸光值.平行两组.
\x05用蒸馏水代替稀释溶液做对照实验.
5.2.4 标准曲线
\x05用4.00 mL羟脯氨酸标准工作液一次代替稀释后的水解产物,进行同样操作;
\x05以扣除了空白吸光值的标准工作液的吸光度为纵坐标,以相应的浓度为横坐标,绘制标准曲线.
胶原蛋白的测定方法和原理 或者说下下面这个实验叫什么方法 和它的原理 5.1 药品配制5.1.1 硫酸溶液[c(H2SO4)≈3 mol/L]\x05量取750 mL水于2 L的容量瓶中,在搅拌下缓慢加入320 mL浓硫酸().冷却至
胶原蛋白测定试验原理:
胶原蛋白在浓酸或浓碱的条件下,经过高温长时间水解,彻底变成游离的氨基酸.其中的羟脯氨酸首先用氯胺T氧化生成含吡咯环的物质,然后以高氯酸溶液除去剩余的氯胺一T,加入对——二甲基氨基苯甲醛溶液作为显色剂,生成红色化合物,用紫外可见分光光度计,在558am处测吸光值.从而可得羟脯氨酸的质量浓度.
试验名称:分光光度法测定鱼皮中胶原蛋白的含量,试验原理:同上