RT-PCR做不出来我是一个新手,我现在在做反转录,在PCR,可是我扩了好几次,就是做不出什么,我排除了试剂的问题,就是手法问题,

来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/04/29 02:53:07
RT-PCR做不出来我是一个新手,我现在在做反转录,在PCR,可是我扩了好几次,就是做不出什么,我排除了试剂的问题,就是手法问题,

RT-PCR做不出来我是一个新手,我现在在做反转录,在PCR,可是我扩了好几次,就是做不出什么,我排除了试剂的问题,就是手法问题,
RT-PCR做不出来
我是一个新手,我现在在做反转录,在PCR,可是我扩了好几次,就是做不出什么,我排除了试剂的问题,就是手法问题,

RT-PCR做不出来我是一个新手,我现在在做反转录,在PCR,可是我扩了好几次,就是做不出什么,我排除了试剂的问题,就是手法问题,
建议你先找一现成的DNA模板及相应的引物,然后做PCR,如果做出来了说明PCR体系没有问题.那问题就可能是出在反转录上了,RNA提取好之后可以跑个电泳或者检测OD值,以确认RNA提取是否成功.另外,检查是否用错反转录引物?针对不同的RNA样本类型要使用不用的反转录引物,病毒细菌之类的用随机引物作反转录引物,动植物RNA用OligodT(我们实验室用17个T的引物)作为反转录引物.

RT-PCR做不出来我是一个新手,我现在在做反转录,在PCR,可是我扩了好几次,就是做不出什么,我排除了试剂的问题,就是手法问题, 革兰氏阳性菌菌落PCR问题我最近也在做菌落PCR验证,我是直接挑单菌落进行PCR验证的,但是电泳不出现条带,胶孔里有明亮物质,100bp处有很多模糊的亮色物,我是一个新手,还望您指教一下,我这种 为什么我的RT-PCR内参跑不出来.目的条带到是跑出来了 PCR产物测序问题用PCR产物直接测序,PCR产物是1200bp左右,但是测出来只有1000bp,请问为什么少了这么多序列呢,我是新手,刚开始做,很多不懂得,望请指教, pcr 不出来我现在在做pcr,这个位点开始做的时候还出结果,可做二天后就不出结果了,条件和以前的一样,很不稳定,有时候出,有时候不出结果, 我做RT-PCR要用Marker和β-actin吗?我现在要做RT-PCR,从大鼠肝细胞中提RNA,听一个学长说提出总RNA后可以取一半跑下电泳,看看RNA的量,这一步需不需要Marker呢?还有之后做PCR跑电泳是不是还要订个β-ac 大片段的RT-PCR现在在做RT-PCR,目的片段5500多bp,用什么样的反应体系和条件能P出来啊?..希望知道或做过这方面实验的帮帮忙,如果p出来,下一步用什么载体连接最好,实验室里有T3、pMD19-Tps:我的 胞水平进行WB和RT-PCR所需多少细胞,一般用多大的板子培养才能提足所需蛋白和RNA?我是实验新手,拟在细胞上行WB和RT-PCR,由于实验基础太差,不知道细胞水平进行WB和RT-PCR所需多少细胞,一般用多 做RT-PCR需订什么试剂我现在要做RT-PCR实验,都需要订什么试剂呢?trizolrna pcr kit 还需要什么呢?上面两个试剂怎么订呢 兼并引物 RT-PCR我才开始做分子,请问:我的实验材料中有一个酶的基因序列没有报道过,我需要设计兼并引物然后RT-PCR.那么,这样做出来的结果可以直接说明这个酶的基因表达情况吗?就是我还 PCR仪热盖在哪我现在写一个PCR仪维护计划,不知道热盖在哪, 我现在提的DNA的OD值都在1.8左右,含量也在300左右,但是为什么用mix做PCR的时候,做不出来?但是我以前用的那个DNA提取盒提的DNA用我目前的引物和Mix都能做出条带来啊,就是换了一个试剂盒就不 普通的RT-PCR 和荧光定量PCR,在反转录这一步是不是一样的?我买的是普通的反转录试剂盒,是不是再增加一个做荧光定量PCR的PCR那一部分就可以了? 连接前加错了酶切的载体怎么办?我是个新手,做实验的时候在连接转化前,加入载体加错了,应该加NdeI-HindIII酶切的PET-28a,我加成了NdeI-XholI酶切的PET-28a~现在涂板已经长出来了但是不对吧~怎么办 最近在做实验RT-PCR,我做RT-PCR,一对引物Tm值分别是52.2,54.6.目的片段1062,PCR反应条件怎么设置呀 我做的RT-PCR怎么样让内参一致?刚入门 老板让做内参的条件 反复做也没有要P出来的目的条带 我的退火温度是55 可以的 但是用这个条件去P 其他的样就P不出来 应该怎么办? 悠悠球怎么搭线?我是悠悠球新手,现在用的是冰魄,也是我第一个悠悠球.新手嘛,所以不会搭线,哪位大师教一教啦. 我是新手来的,我在做任务.