Affinity pull down assay (DAPA)的实验原理?我正在看的文献里方法上是这样说的,先设计DNA probe,然后获得一个400bp的probe,再hybridized to 链霉亲和素--coated magnetic beads。再把这个跟细胞核提取物孵育
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/06/22 02:40:52
![Affinity pull down assay (DAPA)的实验原理?我正在看的文献里方法上是这样说的,先设计DNA probe,然后获得一个400bp的probe,再hybridized to 链霉亲和素--coated magnetic beads。再把这个跟细胞核提取物孵育](/uploads/image/z/11778888-48-8.jpg?t=Affinity+pull+down+assay+%28DAPA%29%E7%9A%84%E5%AE%9E%E9%AA%8C%E5%8E%9F%E7%90%86%3F%E6%88%91%E6%AD%A3%E5%9C%A8%E7%9C%8B%E7%9A%84%E6%96%87%E7%8C%AE%E9%87%8C%E6%96%B9%E6%B3%95%E4%B8%8A%E6%98%AF%E8%BF%99%E6%A0%B7%E8%AF%B4%E7%9A%84%EF%BC%8C%E5%85%88%E8%AE%BE%E8%AE%A1DNA+probe%EF%BC%8C%E7%84%B6%E5%90%8E%E8%8E%B7%E5%BE%97%E4%B8%80%E4%B8%AA400bp%E7%9A%84probe%EF%BC%8C%E5%86%8Dhybridized+to+%E9%93%BE%E9%9C%89%E4%BA%B2%E5%92%8C%E7%B4%A0--coated+magnetic+beads%E3%80%82%E5%86%8D%E6%8A%8A%E8%BF%99%E4%B8%AA%E8%B7%9F%E7%BB%86%E8%83%9E%E6%A0%B8%E6%8F%90%E5%8F%96%E7%89%A9%E5%AD%B5%E8%82%B2)
Affinity pull down assay (DAPA)的实验原理?我正在看的文献里方法上是这样说的,先设计DNA probe,然后获得一个400bp的probe,再hybridized to 链霉亲和素--coated magnetic beads。再把这个跟细胞核提取物孵育
Affinity pull down assay (DAPA)的实验原理?
我正在看的文献里方法上是这样说的,先设计DNA probe,然后获得一个400bp的probe,再hybridized to 链霉亲和素--coated magnetic beads。
再把这个跟细胞核提取物孵育,然后The probes were then immobilized on a magnetic stand,and unbound proteins were removed。
谁能简单介绍下原理
Affinity pull down assay (DAPA)的实验原理?我正在看的文献里方法上是这样说的,先设计DNA probe,然后获得一个400bp的probe,再hybridized to 链霉亲和素--coated magnetic beads。再把这个跟细胞核提取物孵育
你基本都说出来了.
DNA probe 和链霉亲和素杂交在一起,而链霉亲和素能够和magnetic beads亲和结合,所以经过孵育之后,再将细胞核提取物流过beads,DNA probe是400bp的,所以和目的DNA结合力相当高,就将目的DNA留在beads里面,其他不能结合的就都被去除.最后,在用专门的洗脱液(对应于链霉亲和素)进行洗脱,得到目的DNA.
你可以看看 GST-tag ,his- tag,等等pull down assay 的实验原理,虽然这些是针对蛋白的,但是原理一样,很简单的,记得做好control就行了.
你这明显是在扯吧,什么DNA和目的DNA结合,还目的DNA留在beads里面,不懂不要乱回答,语无伦次,误人子弟。就是拿个DNA探针挂在beads上,然后和核抽提物共孵育,寻找可以与该探针结合的蛋白。beads的作用就是DNA探针的把手,不然你怎么操作呢,一洗不就全没了。最后洗完了质谱或者western检测。真服了这个满意回答了,完全是bullshit...
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你这明显是在扯吧,什么DNA和目的DNA结合,还目的DNA留在beads里面,不懂不要乱回答,语无伦次,误人子弟。就是拿个DNA探针挂在beads上,然后和核抽提物共孵育,寻找可以与该探针结合的蛋白。beads的作用就是DNA探针的把手,不然你怎么操作呢,一洗不就全没了。最后洗完了质谱或者western检测。真服了这个满意回答了,完全是bullshit
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