感受态细胞有沉淀BL21制备感受态细胞,用CaCl2/15%甘油悬浮后,-20度保存,发现底部有沉淀.转化质粒时,37度复苏细胞1h后,在EP管底部有絮团状沉淀.(转化质粒失败)这两种沉淀正常么?是什么原因造
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/06/23 13:43:46
![感受态细胞有沉淀BL21制备感受态细胞,用CaCl2/15%甘油悬浮后,-20度保存,发现底部有沉淀.转化质粒时,37度复苏细胞1h后,在EP管底部有絮团状沉淀.(转化质粒失败)这两种沉淀正常么?是什么原因造](/uploads/image/z/1271129-41-9.jpg?t=%E6%84%9F%E5%8F%97%E6%80%81%E7%BB%86%E8%83%9E%E6%9C%89%E6%B2%89%E6%B7%80BL21%E5%88%B6%E5%A4%87%E6%84%9F%E5%8F%97%E6%80%81%E7%BB%86%E8%83%9E%2C%E7%94%A8CaCl2%2F15%25%E7%94%98%E6%B2%B9%E6%82%AC%E6%B5%AE%E5%90%8E%2C-20%E5%BA%A6%E4%BF%9D%E5%AD%98%2C%E5%8F%91%E7%8E%B0%E5%BA%95%E9%83%A8%E6%9C%89%E6%B2%89%E6%B7%80.%E8%BD%AC%E5%8C%96%E8%B4%A8%E7%B2%92%E6%97%B6%2C37%E5%BA%A6%E5%A4%8D%E8%8B%8F%E7%BB%86%E8%83%9E1h%E5%90%8E%2C%E5%9C%A8EP%E7%AE%A1%E5%BA%95%E9%83%A8%E6%9C%89%E7%B5%AE%E5%9B%A2%E7%8A%B6%E6%B2%89%E6%B7%80.%28%E8%BD%AC%E5%8C%96%E8%B4%A8%E7%B2%92%E5%A4%B1%E8%B4%A5%29%E8%BF%99%E4%B8%A4%E7%A7%8D%E6%B2%89%E6%B7%80%E6%AD%A3%E5%B8%B8%E4%B9%88%3F%E6%98%AF%E4%BB%80%E4%B9%88%E5%8E%9F%E5%9B%A0%E9%80%A0)
感受态细胞有沉淀BL21制备感受态细胞,用CaCl2/15%甘油悬浮后,-20度保存,发现底部有沉淀.转化质粒时,37度复苏细胞1h后,在EP管底部有絮团状沉淀.(转化质粒失败)这两种沉淀正常么?是什么原因造
感受态细胞有沉淀
BL21制备感受态细胞,用CaCl2/15%甘油悬浮后,-20度保存,发现底部有沉淀.转化质粒时,37度复苏细胞1h后,在EP管底部有絮团状沉淀.(转化质粒失败)
这两种沉淀正常么?是什么原因造成的?
感受态细胞有沉淀BL21制备感受态细胞,用CaCl2/15%甘油悬浮后,-20度保存,发现底部有沉淀.转化质粒时,37度复苏细胞1h后,在EP管底部有絮团状沉淀.(转化质粒失败)这两种沉淀正常么?是什么原因造
一般保存是在-80摄氏度,-20度可以放一段时间,但不能太长.底部有沉淀正常,甘油只是悬浮菌体,而不能溶解,久了就会沉淀下来!转化质粒失败是其他原因,最大可能性是感受态无活性,建议重做感受态,及做即用,效果最好,剩下放置于-80度,甘油可20%.
同学,感受态制备后要立即用液氮速冻然后放到-80℃保存的。你放在-20℃不会冻结或冻结的很慢(因为你掺了甘油),菌体当然会沉淀了。这样感受态效率会很低的。
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