用XhoⅠ和NdeⅠ双酶切pET30a质粒总是只有一条带怎么回事?我用XhoⅠ和NdeⅠ双酶切pET30a质粒,但是酶切后电泳检测总是只有一条带,感觉没有切开,我已经重复酶切多次,而且也用来连接过,事实证明
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/06/21 11:46:22
![用XhoⅠ和NdeⅠ双酶切pET30a质粒总是只有一条带怎么回事?我用XhoⅠ和NdeⅠ双酶切pET30a质粒,但是酶切后电泳检测总是只有一条带,感觉没有切开,我已经重复酶切多次,而且也用来连接过,事实证明](/uploads/image/z/7004397-21-7.jpg?t=%E7%94%A8Xho%E2%85%A0%E5%92%8CNde%E2%85%A0%E5%8F%8C%E9%85%B6%E5%88%87pET30a%E8%B4%A8%E7%B2%92%E6%80%BB%E6%98%AF%E5%8F%AA%E6%9C%89%E4%B8%80%E6%9D%A1%E5%B8%A6%E6%80%8E%E4%B9%88%E5%9B%9E%E4%BA%8B%3F%E6%88%91%E7%94%A8Xho%E2%85%A0%E5%92%8CNde%E2%85%A0%E5%8F%8C%E9%85%B6%E5%88%87pET30a%E8%B4%A8%E7%B2%92%2C%E4%BD%86%E6%98%AF%E9%85%B6%E5%88%87%E5%90%8E%E7%94%B5%E6%B3%B3%E6%A3%80%E6%B5%8B%E6%80%BB%E6%98%AF%E5%8F%AA%E6%9C%89%E4%B8%80%E6%9D%A1%E5%B8%A6%2C%E6%84%9F%E8%A7%89%E6%B2%A1%E6%9C%89%E5%88%87%E5%BC%80%2C%E6%88%91%E5%B7%B2%E7%BB%8F%E9%87%8D%E5%A4%8D%E9%85%B6%E5%88%87%E5%A4%9A%E6%AC%A1%2C%E8%80%8C%E4%B8%94%E4%B9%9F%E7%94%A8%E6%9D%A5%E8%BF%9E%E6%8E%A5%E8%BF%87%2C%E4%BA%8B%E5%AE%9E%E8%AF%81%E6%98%8E)
用XhoⅠ和NdeⅠ双酶切pET30a质粒总是只有一条带怎么回事?我用XhoⅠ和NdeⅠ双酶切pET30a质粒,但是酶切后电泳检测总是只有一条带,感觉没有切开,我已经重复酶切多次,而且也用来连接过,事实证明
用XhoⅠ和NdeⅠ双酶切pET30a质粒总是只有一条带怎么回事?
我用XhoⅠ和NdeⅠ双酶切pET30a质粒,但是酶切后电泳检测总是只有一条带,感觉没有切开,我已经重复酶切多次,而且也用来连接过,事实证明确实没有酶切开.但是我反复检查自己的操作都不知道问题出在哪里?我实验室的师兄师姐也没办法了.
用XhoⅠ和NdeⅠ双酶切pET30a质粒总是只有一条带怎么回事?我用XhoⅠ和NdeⅠ双酶切pET30a质粒,但是酶切后电泳检测总是只有一条带,感觉没有切开,我已经重复酶切多次,而且也用来连接过,事实证明
一条带就对了,要是没切开会有好几条带的,双酶切后的小片段太短了,只有大片段的百分之几,所以亮度也只有大片段的百分之几,仪器的灵敏度也是有限的,就像肉眼看不到细菌一样,看不到不表示不存在啊.
嘻嘻,这是个顽固的质粒.
XhoⅠ NdeⅠ相隔的距离是多远呢?如果很小的话,电泳时看不到小带的;如果同时酶切的效果不好,可以先酶切一个,回收DNA,再用第二个酶切,再回收,但要求起始质粒的浓度和量比较高!
NdeI 酶切之前必须用乙醇沉淀法重新纯化DNA,
直接用试剂盒抽提出来的DNA很难切动。
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用Takara的BamH 1和Xho 1做同步双酶切,但是BamH 1的最佳温度是30℃而Xho 1是37℃,这反应温度应该怎么选
含有 NdeⅠ和EcoR Ⅰ酶切位点的复制载体和表达载体
pCAMBIA1301和目的基因质粒,都用Kpn I 和Xho I双酶切,回收后亮度挺好的,为什么连接转化总是不长
pET15b空载用Nde I和BamH I酶切怎么才算切完全?
电机技术参数DE和NDE是什么意思
HindⅢ(173),NdeⅠ(238)这些之中括号内表示什么意思呢?
酶切位点如何选择,我正向引物和反向引物的酶切位点选择的是BamHI,和Xho I,可以吗
在含卡那的培养板和培养基中都长,菌液PCR也有,就是提不出来质粒用pET30a构建原核表达载体,连接产物转化,长了满板,条单克隆到含卡那的液体培养基中,长了,菌液PCR有条带,但提质粒提不出来
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pMD18-T上有Xho I 酶切位点吗?
载体PET32a+与PET30a有什么区别?我用的是PET32a+做载体,但之前他们克隆基因时设计的载体是PET30.现在想知道这两种载体的区别,看看是不是要重新做.
石油机械API标准中NDE是什么意思
电机铭牌中NDE指什么
英语翻译请勿用翻译软体直译~请略懂德文的人帮我将以下德文句子翻译成中文~非常感激!1.Haben Sie etwas gegen beanspruchte Hände?Die Hände sind sehr trocken.2.Man darf in Deutschland nicht einfach Arzneimittel
不用iptg诱导,蛋白会表达吗我做原核表达,载体为pet30a,转到BL21中,没有加入IPTG的菌液和加入IPTG 的菌液跑SDS-PAGE,在预测蛋白大小处均有蛋白表达,不知道什么原因为了确定是否为我的目的蛋白,
英语 (改现在分词和第三人称单数)1.draw 2.listen 3.buy 4.catch 5.watch 6.wash 7.write 8.nde 9.have 10.fly 11.swim 12.get 13.nod