【求助/交流】镍柱纯化时,咪唑洗脱液需要调pH吗
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/06/20 06:59:09
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liyan66007(站内联系TA)不用调啊,直接buffer A加咪唑就是,上镍柱前要过滤王会征(站内联系TA)当然要调啊,挂Ni柱平衡、洗杂、洗脱液的pH都应该是一致的.月月大可(站内联系TA)偶认为必须调!
还想问一下,平衡和洗杂的成分是一样的吗 当然应该是一样,不然就会引进太多变化的条件,如果出了问题,就难找了.
不过一般情况下问题也不大tancf(站内联系TA)可以单配一个咪唑的母液,调好PH,取不同体积的咪唑和你的平衡液混和,就是有梯度的洗脱液了,还不用每个调PH~
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镍离子亲和柱纯化蛋白的洗脱液和平衡液怎么配?我第一次做蛋白,请尽量说详细点我手上只有一个笔记,是这样写的平衡液:50mM 磷酸钠 300mM氯化钠洗脱液:150mM咪唑具体的洗脱的步骤都有,1.平
镍柱纯化时,镍离子被洗脱下来掉到蛋白溶液里对蛋白有影响吗?透析时只有透析掉咪唑为什么不说把镍离子透析镍离子别洗掉了所以才会有镍柱重生,重新挂镍离子上去吧!
Ni-NTA纯化问题,获得不了纯的目的蛋白!我们用的是导入质粒的大肠杆菌,然后用IPTG诱导,然后将细菌裂解.去掉细菌沉淀,上清过柱,然后用浓度为20mM,40mM,60mM,100mM,150mM,200mM的含有咪唑的洗脱液洗脱
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