提取DNA,跑完电泳发现蛋白质过多,有没办法在这模板上继续去除蛋白质?提取出的模板已经用TE保存,有没办法在这模板继续将蛋白质去除?
来源:学生作业帮助网 编辑:作业帮 时间:2024/06/23 21:37:51
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提取DNA,跑完电泳发现蛋白质过多,有没办法在这模板上继续去除蛋白质?提取出的模板已经用TE保存,有没办法在这模板继续将蛋白质去除?
提取DNA,跑完电泳发现蛋白质过多,有没办法在这模板上继续去除蛋白质?
提取出的模板已经用TE保存,有没办法在这模板继续将蛋白质去除?
提取DNA,跑完电泳发现蛋白质过多,有没办法在这模板上继续去除蛋白质?提取出的模板已经用TE保存,有没办法在这模板继续将蛋白质去除?
楼上没说清楚,我补充下,模板原液你可以根据你的DNA定量的浓度适当的加TE后,假如等体积的24:1的氯仿/异戊醇重新抽提1到2次,抽提手摇的话20分钟差不多了,然后9000rpm离心10分钟,取上清等体积异丙醇沉淀或者2倍体积无水乙醇沉淀,沉淀过夜(不赶时间的话),13200rpm离心10min,去上清,70%乙醇洗一次,13200rpm离心5分钟,烘干,溶解灭活.定量
保存液再加入部分水后,加入等体积氯仿/异戊醇重新抽提,离心后取上清,用水溶解
溶解后加入3M NaOAc(pH5.2)(1/10体积)(或7.5M AmmAc(1/2体积))和2倍体积的无水乙醇重沉淀核酸。
—20℃温育10min。13000rpm,离心20min。
用70%乙醇洗一次,13000rpm,室温,离心5分钟。
干燥。
如果觉得还有蛋白,就再重复...
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保存液再加入部分水后,加入等体积氯仿/异戊醇重新抽提,离心后取上清,用水溶解
溶解后加入3M NaOAc(pH5.2)(1/10体积)(或7.5M AmmAc(1/2体积))和2倍体积的无水乙醇重沉淀核酸。
—20℃温育10min。13000rpm,离心20min。
用70%乙醇洗一次,13000rpm,室温,离心5分钟。
干燥。
如果觉得还有蛋白,就再重复该过程。
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